期刊简介

               本刊是由中国科学技术协会主管,中国药理学会主办学术性刊物,以从事新药开发,临床药理学、药物治疗学研究的高中级医疗、科研及教学人员为读者对象。旨在报道临床药理学与治疗学方面新进展及新成果。                

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  • 杂志名称:中国临床药理学与治疗学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国药理学会
  • 国际刊号:1009-2501
  • 国内刊号:34-1206/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏
中国临床药理学与治疗学杂志2009年第01期

定量检测人超敏C-反应蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步临床应用

沈丹丹;卞智萍;何国平;顾春荣;徐晋姚;杨笛;张寄南

关键词:定量检测, 超敏C-反应蛋白, ELISA双抗体夹心法
摘要:目的:建立定量检测人超敏C-反应蛋白(CRP)双抗体夹心ELISA方法.方法:采用ProteinA亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体(mAbs),并行SDS-PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗CRP mAbs进行标记HRP后行抗体配对实验:通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的适工作浓度;以纯化的CRP抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法.初步对人血浆中的超敏CRP水平进行检测.结果:佳配对组合为抗CRP mAb 1C10和HRP标记的抗CRP mAb 2C11,适工作浓度分别为10 μg/mL和1:2000,该方法的批内、批间变异系数分别为3.1%~9.7%和3.6%~13.6%,灵敏度达8.3 ng/mL,回收率为90%~109%.用EusA法测定左右冠无明显狭窄者68例,狭窄小于50%者59例和狭窄大于50%患者67例的血浆hs-CRP水平,冠脉狭窄小于50%组(3.7±1.2)mg/L与冠脉无狭窄组(1.8±0.7)mg/L比较明显升高(P<0.05);狭窄大于50%组(8.9±3.3)mg/L与狭窄小于50%组比较明显升高(P<0.05).结论:建立了一种可用于检测人超敏CRP的双抗体夹心ELISA方法.